酶標(biāo)分析儀操作注意事項有哪些?酶標(biāo)分析儀常見故障列舉!
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一、酶標(biāo)分析儀
酶標(biāo)儀廣泛地應(yīng)用在臨床檢驗、生物學(xué)研究、農(nóng)業(yè)科學(xué)、食品和環(huán)境科學(xué)中,例如低紫外區(qū)的DNA、RNA定量及純度分析(A260/A280)和蛋白定量,酶活、酶動力學(xué)檢測,酶聯(lián)免疫測定(ELISAs),細胞增殖與毒性分析,細胞凋亡檢測(MTT),報告基因檢測及G蛋白偶聯(lián)受體分析(GPCR)等。特別在近幾年中,由于大量的酶聯(lián)免疫檢測試劑盒的應(yīng)用,使得酶標(biāo)儀在生殖保健領(lǐng)域中應(yīng)用越來越廣泛,同時促進了生殖健康技術(shù)水平提高。
酶標(biāo)分析儀相關(guān)概念包括:
1. 微孔板。是一種經(jīng)事先包埋專用于放置待測樣本的透明塑料板,板上有多排大小均勻一致的小孔,孔內(nèi)都包埋著相應(yīng)的抗原或抗體,微孔板上每個小孔可盛放零點幾毫升的溶液。
2. 中心定位。儀器會自動對酶標(biāo)孔進行中心定位,中心定位是要消除酶標(biāo)孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來檢測的不準(zhǔn)確。在對每一個酶標(biāo)儀進行檢測時,儀器其實要進行35個點的測量,選取最中間的5個點的均值為本孔的OD(optical density)值。
3. 光源的參照通道。參照通道是用來校準(zhǔn)由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來的影響。
4. 質(zhì)量控制。質(zhì)量控制是試劑檢測的重要因素。請按照試劑說明書的要求進行質(zhì)量控制。
5. 空白校正。有一些試劑盒的說明書將空白孔設(shè)置為空氣,其它大多數(shù)空白孔的設(shè)置是用試劑來設(shè)置的,請按照試劑盒的說明書要求進行。
二、酶標(biāo)分析儀操作注意事項
酶標(biāo)儀的功能是用來讀取酶聯(lián)免疫試劑盒的反應(yīng)結(jié)果,因此要得到準(zhǔn)確結(jié)果,試劑盒的使用必須規(guī)范。許多醫(yī)院在使用酶標(biāo)儀之前是通過目測判斷結(jié)果,操作過程隨意性較大,在使用酶標(biāo)儀后如果不能及時糾正操作習(xí)慣,會造成較大誤差。在酶標(biāo)儀的操作中應(yīng)注意以下事項:
1. 使用加液器加液,加液頭不能混用。
2. 洗板要洗干凈。如果條件允許,使用洗板機洗板,避免交叉污染。
3. 嚴(yán)格按照試劑盒的說明書操作,反應(yīng)時間準(zhǔn)確。
4. 在測量過程中,請勿碰酶標(biāo)板,以防酶標(biāo)板傳送時擠傷操作人員的手。
5. 請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部,操作完成后請洗手。
6. 如果使用的樣品或試劑具有污染性、毒性和生物學(xué)危害,請嚴(yán)格按照試劑盒的操作說明,以防對操作人員造成損害。
7. 如果儀器接觸過污染性或傳染性物品,請進行清洗和消毒。
8. 不要在測量過程中關(guān)閉電源。
9. 對于因試劑盒問題造成的測量結(jié)果的偏差,應(yīng)根據(jù)實際情況及時修改參數(shù),以達到最佳效果。
10. 使用后蓋好防塵罩。
11. 出現(xiàn)技術(shù)故障時應(yīng)及時與廠家聯(lián)系,切勿擅自拆卸。
三、酶標(biāo)分析儀常見故障
故障一:開機后無反應(yīng)。應(yīng)檢查電源線是否接好,保險絲是否燒斷。
故障二:原始吸光度多為負值。應(yīng)檢查空白孔的吸光度值是否太高,酶標(biāo)儀打印出的原始吸光度值是減去空白以后的,如空白太高則可能出現(xiàn)負值。
故障三:酶標(biāo)儀在使用定量功能時,曲線出現(xiàn)異常形態(tài)??赡芸蛻羰褂昧司€性/對數(shù)的曲線模式,同時使用了濃度為0的標(biāo)準(zhǔn)物,導(dǎo)致機器無法對0取對數(shù),從而形成了異常的曲線形態(tài)。
故障四:在做定量測定時,打印報告中的濃度值出現(xiàn)****,提示超出曲線范圍。標(biāo)準(zhǔn)的吸光度過高可能導(dǎo)致曲線的上移,使許多低吸光度值的樣本無法打印在報告上,可以通過稀釋標(biāo)準(zhǔn)樣本使曲線下移,從而解決上述的問題。
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