液相色譜儀檢測器的類型

液相色譜儀檢測器主要包括以下幾種類型：

紫外-可見光檢測器(UV/Vis)：這種檢測器利用樣品中吸收紫外光的特性進行檢測和定量分析，適用于各種有色或無色物質(zhì)，具有靈敏度高、可靠性強等優(yōu)點。

光電二極管陣列檢測器(DAD檢測器)：實際上是紫外檢測器的一種，可以進行全波長檢測，實現(xiàn)3D光譜分析。雖然使用量不大，但由于其關(guān)鍵技術(shù)尚未被廣泛掌握，制造成本較高，檢測限略低于紫外檢測器。

熒光檢測器：這種檢測器適用于能激發(fā)熒光的化合物，尤其是在生物樣品痕量分析中具有重要作用。熒光檢測器在實驗過程中需要注意脫氣，以避免系統(tǒng)殘留的氧氣引發(fā)的熒光淬滅反應(yīng)。

示差折光檢測器(RID或CD)：這種檢測器測定柱后流出液的總體物理性質(zhì)的變化，如折射率和電導(dǎo)率。由于其靈敏度較低且對溫度和流量波動較為敏感，不適用于痕量分析和梯度洗脫。

蒸發(fā)光散射檢測器：這是一種通用檢測器，適用于梯度洗脫檢測，但靈敏度和重復(fù)性不如其他檢測器。

電噴霧檢測器：雖然現(xiàn)在還不算非常成熟，但它提供了一種新的檢測方式，具有較高的靈敏度，適合梯度洗脫檢測。

電化學(xué)檢測器：包括脈沖伏安檢測器、電導(dǎo)檢測器、電位檢測器等，這些檢測器利用電化學(xué)方法測量樣品電化學(xué)反應(yīng)，適用于樣品中含有金屬離子和有機離子的檢測與分析。2

質(zhì)譜檢測器：這是液相色譜儀中應(yīng)用最廣泛的高靈敏度檢測器之一，能夠?qū)悠分械姆肿舆M行結(jié)構(gòu)鑒定、1)紫外吸收檢測器　 紫外吸收檢測器常用氘燈作光源，氘燈則發(fā)射出紫外-可見區(qū)范圍的連續(xù)波長，并安裝一個光柵型單色器，其波長選擇范圍寬(190nm～800nm)。它有兩個流通池，一個作參比，一個作測量用，光源發(fā)出的紫外光照射到流通池上，若兩流通池都通過純的均勻溶劑，則它們在紫外波長下幾乎無吸收，光電管上接受到的輻射強度相等，無信號輸出。當(dāng)組分進入測量池時，吸收一定的紫外光，使兩光電管接受到的輻射強度不等，這時有信號輸出，輸出信號大小與組分濃度有關(guān)。 局限：流動相的選擇受到一定限制，即具有一定紫外吸收的溶劑不能做流動相，每種溶劑都有截止波長，當(dāng)小于該截止波長的紫外光通過溶劑時，溶劑的透光率降至10%以下，因此，紫外吸收檢測器的工作波長不能小于溶劑的截止波長。 (2)光電二極管陣列檢測器(photodiode array detector， PDAD) 也稱快速掃描紫外可見分光檢測器，是一種新型的光吸收式檢測器。它采用光電二極管陣列作為檢測元件，構(gòu)成多通道并行工作，同時檢測由光柵分光，再入射到陣列式接收器上的全部波長的光信號，然后對二極管陣列快速掃描采集數(shù)據(jù)，得到吸收值(A)是保留時間(tR)和波長(l)函數(shù)的三維色譜光譜圖。由此可及時觀察與每一組分的色譜圖相應(yīng)的光譜數(shù)據(jù)，從而迅速決定具有最佳選擇性和靈敏度的波長。 單光束二極管陣列檢測器，光源發(fā)出的光先通過檢測池，透射光由全息光柵色散成多色光，射到陣列元件上，使所有波長的光在接收器上同時被檢測。陣列式接收器上的光信號用電子學(xué)的方法快速掃描提取出來，每幅圖象僅需要10ms，遠遠超過色譜流出峰的速度，因此可隨峰掃描。

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熒光檢測器

熒光檢測器(fluorescence detector， FD) 是一種高靈敏度、有選擇性的檢測器，可檢測能產(chǎn)生熒光的化合物。某些不發(fā)熒光的物質(zhì)可通過化學(xué)衍生化生成熒光衍生物，再進行熒光檢測。其最小檢測濃度可達0.1ng/ml，適用于痕量分析;一般情況下熒光檢測器的靈敏度比紫外檢測器約高2個數(shù)量級，但其線性范圍不如紫外檢測器寬?！　〗陙?，采用激光作為熒光檢測器的光源而產(chǎn)生的激光誘導(dǎo)熒光檢測器極大地增強了熒光檢測的信噪比，因而具有很高的靈敏度，在痕量和超痕量分析中得到廣泛應(yīng)用。

高效液相色譜儀的光學(xué)類檢測器:

高效液相色譜儀的紫外吸收檢測器廣泛用于高效液相色譜,它需要對所測試的樣品組分進行UV吸收，并且是選擇性檢測器。

高效液相色譜儀的二極管陣列探測器(DAD)是20世紀80年代出現(xiàn)的一種光學(xué)多通道探測器，掃描各洗脫組分的色譜圖，經(jīng)計算機處理，得到了色譜圖與色譜圖相結(jié)合的三維圖譜。吸收光譜用于定性分析(以確定其是否為單一純物質(zhì))，色譜用于定量分析，并常用于復(fù)雜樣品(如生物樣品、中草藥)的定性和定量分析。

熒光檢測器也是一種高靈敏度的選擇性檢測器。常用的高效液相色譜(HPLC)檢測器也被廣泛使用，僅次于紫外吸收檢測器。它適用于刺激熒光的化合物。許多生命科學(xué)相關(guān)的物質(zhì)，如氨基酸、胺類、維生素、類固醇和一些代謝藥物，都可以通過熒光檢測到。熒光檢測器可用于生物樣品的微量分析，特別是經(jīng)熒光衍生后，可檢測出極少量的氨基酸和多肽。

高效液相色譜儀的通用型檢測器:

高效液相色譜儀的差示折射率檢測器是一種通用類型的檢測器，只要測量組分的折射率不同于洗脫液的折射率，就可以使用它。生命科學(xué)中經(jīng)常遇到所有類型的碳水化合物，并且沒有紫外線吸收。通常使用差示折射率檢測器。它的多功能性大于UVD，但其靈敏度低，對溫度變化敏感，與梯度洗脫不相容，限制了其應(yīng)用。

高效液相色譜儀的蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD)也是一種多功能的檢測器，它可以檢測任何比流動相波動性小的樣品，而不需要含有發(fā)色團的樣品。蒸發(fā)光散射探測器的響應(yīng)與樣品的質(zhì)量成正比。它可用于測定樣品的純度或檢測未知樣品。蒸發(fā)光散射檢測器比折射率檢測器更靈敏，對溫度變化不敏感，具有穩(wěn)定的梯度洗脫基線。

高效液相色譜儀的質(zhì)譜檢測器是另一種通用的檢測器，它具有靈敏度高、選擇性強、通用性強等優(yōu)點，能夠提供化合物的分子量和結(jié)構(gòu)信息。然而，它昂貴的操作成本和復(fù)雜性限制了它的應(yīng)用。

紫外可見檢測器靈敏度高，線性范圍寬，對流速和溫度變化不敏感，可用于梯度洗脫分離。該檢測器要求被檢測樣品組分有紫外-可見光吸收，而使用的流動相無吸收，或在被測組分吸收波長處無吸收。一般選擇在待分析物最大吸收波長處進行檢測，以獲得最高靈敏度和抗干擾能力。在沒有最大吸收時，可采用末端吸收。檢測波長的選擇除取決于待測物質(zhì)的成分和分子結(jié)構(gòu)外，還必須考慮流動相組成、共存組分干擾等因素。特別是各種溶劑都有一定的透過波長下限值，超過這個波長，溶劑的吸收會變得很強，以至于不能很好地測出待測物質(zhì)的吸收強度。

2、光電二極管陣列檢測器(Photodiode Array Detector)

簡稱PDA，又稱為二極管陣列檢測器(DAD)。這種檢測器以光電二極管陣列作為檢測元件，可進行多通道并行檢測，在一次色譜測量中，可同時獲得時間、波長、吸光度三者的關(guān)系，通過計算機處理，在熒光屏上顯示出三維圖譜，也可作出任意波長的吸光度-時間曲線和任意時間的吸光度-波長曲線。

3、示差折光檢測器

示差折光檢測器是一種通用型檢測器?；谶B續(xù)測定液相色譜色譜柱流出物光折射率的變化而用于測定溶質(zhì)濃度，溶液的光折射率是溶劑流動相和溶質(zhì)各自的折射率乘以其物質(zhì)的量濃度之和，溶有樣品的流動相和流動相本身之間光折射率之差即表示樣品在流動相中濃度。

原則上，凡是與流動相光折射率有差別的樣品都可用它來測定，其檢測限可達(10^-6～10^-7)g/ml。應(yīng)注意的是，選擇溶劑時必須考慮溶劑的光折射率。但這種檢測器靈敏度低，對溫度、流動相組成等的變化敏感，而且與梯度洗脫不相容，很大程度地限制了它的應(yīng)用范圍。在藥物分析中，這種檢測器多用于多糖類、萜類化合物等分子量和含量的測定。

4、熒光檢測器(Fluorescence Detector)

熒光檢測器是基于化合物的光致發(fā)光現(xiàn)象，熒光檢測器流通池為直角形的試樣池，用石英材料制成。這一檢測器特別適用于痕量組分和能顯示熒光的物質(zhì)檢測。這種檢測器具有極高的靈敏度和良好的選擇性。一般來說，它比紫外吸收檢測器的靈敏度要高10-1000倍，可達μg/L級，而且需要的試樣很少，因此在藥物和生化分析中有著廣泛的應(yīng)用。

5、蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD)

蒸發(fā)光散射檢測器是一種新型的通用型質(zhì)量檢測器，不同于紫外和熒光檢測器，ELSD的響應(yīng)不依賴于樣品的光學(xué)特性，任何揮發(fā)性低于流動相的樣品均能被檢測，不受其官能團的影響。ELSD檢測過程主要分為三個步驟：首先是霧化過程，用惰性氣體或凈化空氣將色譜柱流出物霧化;第二步是蒸發(fā)過程，流動相在加熱管(漂移管)中蒸發(fā);第三步是檢測，測定留下來的樣品顆粒的光散射。