液相色譜儀檢測(cè)器的類型

液相色譜儀檢測(cè)器主要包括以下幾種類型：

紫外-可見光檢測(cè)器(UV/Vis)：這種檢測(cè)器利用樣品中吸收紫外光的特性進(jìn)行檢測(cè)和定量分析，適用于各種有色或無色物質(zhì)，具有靈敏度高、可靠性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。

光電二極管陣列檢測(cè)器(DAD檢測(cè)器)：實(shí)際上是紫外檢測(cè)器的一種，可以進(jìn)行全波長(zhǎng)檢測(cè)，實(shí)現(xiàn)3D光譜分析。雖然使用量不大，但由于其關(guān)鍵技術(shù)尚未被廣泛掌握，制造成本較高，檢測(cè)限略低于紫外檢測(cè)器。

熒光檢測(cè)器：這種檢測(cè)器適用于能激發(fā)熒光的化合物，尤其是在生物樣品痕量分析中具有重要作用。熒光檢測(cè)器在實(shí)驗(yàn)過程中需要注意脫氣，以避免系統(tǒng)殘留的氧氣引發(fā)的熒光淬滅反應(yīng)。

示差折光檢測(cè)器(RID或CD)：這種檢測(cè)器測(cè)定柱后流出液的總體物理性質(zhì)的變化，如折射率和電導(dǎo)率。由于其靈敏度較低且對(duì)溫度和流量波動(dòng)較為敏感，不適用于痕量分析和梯度洗脫。

蒸發(fā)光散射檢測(cè)器：這是一種通用檢測(cè)器，適用于梯度洗脫檢測(cè)，但靈敏度和重復(fù)性不如其他檢測(cè)器。

電噴霧檢測(cè)器：雖然現(xiàn)在還不算非常成熟，但它提供了一種新的檢測(cè)方式，具有較高的靈敏度，適合梯度洗脫檢測(cè)。

電化學(xué)檢測(cè)器：包括脈沖伏安檢測(cè)器、電導(dǎo)檢測(cè)器、電位檢測(cè)器等，這些檢測(cè)器利用電化學(xué)方法測(cè)量樣品電化學(xué)反應(yīng)，適用于樣品中含有金屬離子和有機(jī)離子的檢測(cè)與分析。2

質(zhì)譜檢測(cè)器：這是液相色譜儀中應(yīng)用最廣泛的高靈敏度檢測(cè)器之一，能夠?qū)悠分械姆肿舆M(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定、1)紫外吸收檢測(cè)器　 紫外吸收檢測(cè)器常用氘燈作光源，氘燈則發(fā)射出紫外-可見區(qū)范圍的連續(xù)波長(zhǎng)，并安裝一個(gè)光柵型單色器，其波長(zhǎng)選擇范圍寬(190nm～800nm)。它有兩個(gè)流通池，一個(gè)作參比，一個(gè)作測(cè)量用，光源發(fā)出的紫外光照射到流通池上，若兩流通池都通過純的均勻溶劑，則它們?cè)谧贤獠ㄩL(zhǎng)下幾乎無吸收，光電管上接受到的輻射強(qiáng)度相等，無信號(hào)輸出。當(dāng)組分進(jìn)入測(cè)量池時(shí)，吸收一定的紫外光，使兩光電管接受到的輻射強(qiáng)度不等，這時(shí)有信號(hào)輸出，輸出信號(hào)大小與組分濃度有關(guān)。 局限：流動(dòng)相的選擇受到一定限制，即具有一定紫外吸收的溶劑不能做流動(dòng)相，每種溶劑都有截止波長(zhǎng)，當(dāng)小于該截止波長(zhǎng)的紫外光通過溶劑時(shí)，溶劑的透光率降至10%以下，因此，紫外吸收檢測(cè)器的工作波長(zhǎng)不能小于溶劑的截止波長(zhǎng)。 (2)光電二極管陣列檢測(cè)器(photodiode array detector， PDAD) 也稱快速掃描紫外可見分光檢測(cè)器，是一種新型的光吸收式檢測(cè)器。它采用光電二極管陣列作為檢測(cè)元件，構(gòu)成多通道并行工作，同時(shí)檢測(cè)由光柵分光，再入射到陣列式接收器上的全部波長(zhǎng)的光信號(hào)，然后對(duì)二極管陣列快速掃描采集數(shù)據(jù)，得到吸收值(A)是保留時(shí)間(tR)和波長(zhǎng)(l)函數(shù)的三維色譜光譜圖。由此可及時(shí)觀察與每一組分的色譜圖相應(yīng)的光譜數(shù)據(jù)，從而迅速?zèng)Q定具有最佳選擇性和靈敏度的波長(zhǎng)。 單光束二極管陣列檢測(cè)器，光源發(fā)出的光先通過檢測(cè)池，透射光由全息光柵色散成多色光，射到陣列元件上，使所有波長(zhǎng)的光在接收器上同時(shí)被檢測(cè)。陣列式接收器上的光信號(hào)用電子學(xué)的方法快速掃描提取出來，每幅圖象僅需要10ms，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過色譜流出峰的速度，因此可隨峰掃描。

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熒光檢測(cè)器

熒光檢測(cè)器(fluorescence detector， FD) 是一種高靈敏度、有選擇性的檢測(cè)器，可檢測(cè)能產(chǎn)生熒光的化合物。某些不發(fā)熒光的物質(zhì)可通過化學(xué)衍生化生成熒光衍生物，再進(jìn)行熒光檢測(cè)。其最小檢測(cè)濃度可達(dá)0.1ng/ml，適用于痕量分析;一般情況下熒光檢測(cè)器的靈敏度比紫外檢測(cè)器約高2個(gè)數(shù)量級(jí)，但其線性范圍不如紫外檢測(cè)器寬?！　〗陙?，采用激光作為熒光檢測(cè)器的光源而產(chǎn)生的激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器極大地增強(qiáng)了熒光檢測(cè)的信噪比，因而具有很高的靈敏度，在痕量和超痕量分析中得到廣泛應(yīng)用。

高效液相色譜儀的光學(xué)類檢測(cè)器:

高效液相色譜儀的紫外吸收檢測(cè)器廣泛用于高效液相色譜,它需要對(duì)所測(cè)試的樣品組分進(jìn)行UV吸收，并且是選擇性檢測(cè)器。

高效液相色譜儀的二極管陣列探測(cè)器(DAD)是20世紀(jì)80年代出現(xiàn)的一種光學(xué)多通道探測(cè)器，掃描各洗脫組分的色譜圖，經(jīng)計(jì)算機(jī)處理，得到了色譜圖與色譜圖相結(jié)合的三維圖譜。吸收光譜用于定性分析(以確定其是否為單一純物質(zhì))，色譜用于定量分析，并常用于復(fù)雜樣品(如生物樣品、中草藥)的定性和定量分析。

熒光檢測(cè)器也是一種高靈敏度的選擇性檢測(cè)器。常用的高效液相色譜(HPLC)檢測(cè)器也被廣泛使用，僅次于紫外吸收檢測(cè)器。它適用于刺激熒光的化合物。許多生命科學(xué)相關(guān)的物質(zhì)，如氨基酸、胺類、維生素、類固醇和一些代謝藥物，都可以通過熒光檢測(cè)到。熒光檢測(cè)器可用于生物樣品的微量分析，特別是經(jīng)熒光衍生后，可檢測(cè)出極少量的氨基酸和多肽。

高效液相色譜儀的通用型檢測(cè)器:

高效液相色譜儀的差示折射率檢測(cè)器是一種通用類型的檢測(cè)器，只要測(cè)量組分的折射率不同于洗脫液的折射率，就可以使用它。生命科學(xué)中經(jīng)常遇到所有類型的碳水化合物，并且沒有紫外線吸收。通常使用差示折射率檢測(cè)器。它的多功能性大于UVD，但其靈敏度低，對(duì)溫度變化敏感，與梯度洗脫不相容，限制了其應(yīng)用。

高效液相色譜儀的蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)也是一種多功能的檢測(cè)器，它可以檢測(cè)任何比流動(dòng)相波動(dòng)性小的樣品，而不需要含有發(fā)色團(tuán)的樣品。蒸發(fā)光散射探測(cè)器的響應(yīng)與樣品的質(zhì)量成正比。它可用于測(cè)定樣品的純度或檢測(cè)未知樣品。蒸發(fā)光散射檢測(cè)器比折射率檢測(cè)器更靈敏，對(duì)溫度變化不敏感，具有穩(wěn)定的梯度洗脫基線。

高效液相色譜儀的質(zhì)譜檢測(cè)器是另一種通用的檢測(cè)器，它具有靈敏度高、選擇性強(qiáng)、通用性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，能夠提供化合物的分子量和結(jié)構(gòu)信息。然而，它昂貴的操作成本和復(fù)雜性限制了它的應(yīng)用。

紫外可見檢測(cè)器靈敏度高，線性范圍寬，對(duì)流速和溫度變化不敏感，可用于梯度洗脫分離。該檢測(cè)器要求被檢測(cè)樣品組分有紫外-可見光吸收，而使用的流動(dòng)相無吸收，或在被測(cè)組分吸收波長(zhǎng)處無吸收。一般選擇在待分析物最大吸收波長(zhǎng)處進(jìn)行檢測(cè)，以獲得最高靈敏度和抗干擾能力。在沒有最大吸收時(shí)，可采用末端吸收。檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇除取決于待測(cè)物質(zhì)的成分和分子結(jié)構(gòu)外，還必須考慮流動(dòng)相組成、共存組分干擾等因素。特別是各種溶劑都有一定的透過波長(zhǎng)下限值，超過這個(gè)波長(zhǎng)，溶劑的吸收會(huì)變得很強(qiáng)，以至于不能很好地測(cè)出待測(cè)物質(zhì)的吸收強(qiáng)度。

2、光電二極管陣列檢測(cè)器(Photodiode Array Detector)

簡(jiǎn)稱PDA，又稱為二極管陣列檢測(cè)器(DAD)。這種檢測(cè)器以光電二極管陣列作為檢測(cè)元件，可進(jìn)行多通道并行檢測(cè)，在一次色譜測(cè)量中，可同時(shí)獲得時(shí)間、波長(zhǎng)、吸光度三者的關(guān)系，通過計(jì)算機(jī)處理，在熒光屏上顯示出三維圖譜，也可作出任意波長(zhǎng)的吸光度-時(shí)間曲線和任意時(shí)間的吸光度-波長(zhǎng)曲線。

3、示差折光檢測(cè)器

示差折光檢測(cè)器是一種通用型檢測(cè)器。基于連續(xù)測(cè)定液相色譜色譜柱流出物光折射率的變化而用于測(cè)定溶質(zhì)濃度，溶液的光折射率是溶劑流動(dòng)相和溶質(zhì)各自的折射率乘以其物質(zhì)的量濃度之和，溶有樣品的流動(dòng)相和流動(dòng)相本身之間光折射率之差即表示樣品在流動(dòng)相中濃度。

原則上，凡是與流動(dòng)相光折射率有差別的樣品都可用它來測(cè)定，其檢測(cè)限可達(dá)(10^-6～10^-7)g/ml。應(yīng)注意的是，選擇溶劑時(shí)必須考慮溶劑的光折射率。但這種檢測(cè)器靈敏度低，對(duì)溫度、流動(dòng)相組成等的變化敏感，而且與梯度洗脫不相容，很大程度地限制了它的應(yīng)用范圍。在藥物分析中，這種檢測(cè)器多用于多糖類、萜類化合物等分子量和含量的測(cè)定。

4、熒光檢測(cè)器(Fluorescence Detector)

熒光檢測(cè)器是基于化合物的光致發(fā)光現(xiàn)象，熒光檢測(cè)器流通池為直角形的試樣池，用石英材料制成。這一檢測(cè)器特別適用于痕量組分和能顯示熒光的物質(zhì)檢測(cè)。這種檢測(cè)器具有極高的靈敏度和良好的選擇性。一般來說，它比紫外吸收檢測(cè)器的靈敏度要高10-1000倍，可達(dá)μg/L級(jí)，而且需要的試樣很少，因此在藥物和生化分析中有著廣泛的應(yīng)用。

5、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)

蒸發(fā)光散射檢測(cè)器是一種新型的通用型質(zhì)量檢測(cè)器，不同于紫外和熒光檢測(cè)器，ELSD的響應(yīng)不依賴于樣品的光學(xué)特性，任何揮發(fā)性低于流動(dòng)相的樣品均能被檢測(cè)，不受其官能團(tuán)的影響。ELSD檢測(cè)過程主要分為三個(gè)步驟：首先是霧化過程，用惰性氣體或凈化空氣將色譜柱流出物霧化;第二步是蒸發(fā)過程，流動(dòng)相在加熱管(漂移管)中蒸發(fā);第三步是檢測(cè)，測(cè)定留下來的樣品顆粒的光散射。