單色激發(fā)光源外圍控制電路設(shè)計(jì)
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【關(guān)鍵字】熒光顯微,手控板,自動(dòng)校準(zhǔn),多級(jí)菜單
1.引言
熒光顯微技術(shù)在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域已得到了廣泛應(yīng)用,是觀測(cè)活細(xì)胞與周圍環(huán)境之間、細(xì)胞內(nèi)生物大分子之間相互作用的有力工具。隨著世界科技發(fā)展不斷深入,尤其是生物、醫(yī)學(xué)、納米科技等領(lǐng)域已進(jìn)入分子生物學(xué)、基因醫(yī)學(xué)、原子層次的發(fā)展新階段,單個(gè)分子或少許分子的熒光顯微檢測(cè)技術(shù)已經(jīng)越來(lái)越引起人們的重視[1]。
由于不同熒光物質(zhì)(生物、生化物質(zhì)或熒光探針)需要不同波長(zhǎng)的激發(fā)光才能發(fā)射熒光, 所以必須具備能控制或改變激發(fā)光波長(zhǎng)的單色激發(fā)光源系統(tǒng)。國(guó)際上熒光檢測(cè)設(shè)備的生產(chǎn)廠商有德國(guó)的TILL、日本的奧林巴斯等公司,其相關(guān)產(chǎn)品有德國(guó)TILL公司生產(chǎn)的Polychrome系列單色光源系統(tǒng),以及日本奧林巴斯最新推出的MVX10研究級(jí)熒光顯微系統(tǒng)。國(guó)內(nèi)有臺(tái)灣明美科技生產(chǎn)的InCyt I/P型鈣離子雙波長(zhǎng)比值熒光影像及測(cè)量系統(tǒng)。他們的單色光源系統(tǒng)大多都采用氙燈作為光源,閃耀光柵作為分光元件,構(gòu)成波長(zhǎng)可連續(xù)無(wú)級(jí)變化的激發(fā)光系統(tǒng),而拋棄了過(guò)去靠濾光片組來(lái)獲得單色光的方法,實(shí)現(xiàn)了波長(zhǎng)全程或指定范圍內(nèi)連續(xù)或重復(fù)掃描(激發(fā)光無(wú)級(jí)變化)、設(shè)定波長(zhǎng)、時(shí)間記錄、設(shè)定步長(zhǎng)、步進(jìn)掃描等功能。我們?cè)谧约旱膯紊ぐl(fā)光源光學(xué)系統(tǒng)已基本成形的基礎(chǔ)上[2],開(kāi)發(fā)了單色光源外圍的電路控制系統(tǒng)。
2.系統(tǒng)總體介紹
單色光源外圍控制電路如圖1所示,由以Cypress公司的USB2.0接口芯片EZ-USB FX2 CY7C68013(以下簡(jiǎn)稱FX2)為核心處理器的硬件電路系統(tǒng)組成。整個(gè)系統(tǒng)可以利用PC機(jī)的光學(xué)掃描應(yīng)用程序,通過(guò)USB接口來(lái)控制整個(gè)光學(xué)系統(tǒng)。也可以在無(wú)PC機(jī)的情況下,通過(guò)手控板來(lái)控制整個(gè)系統(tǒng)。手控板的微處理機(jī)通過(guò)RS232協(xié)議與FX2通訊,通過(guò)手控板的人機(jī)界面實(shí)現(xiàn)對(duì)整個(gè)單色光源系統(tǒng)的控制。溫度監(jiān)測(cè)電路配合FX2對(duì)氙燈光源室的溫度進(jìn)行監(jiān)測(cè),由FX2控制的數(shù)模轉(zhuǎn)換電路及信號(hào)調(diào)理電路實(shí)現(xiàn)對(duì)光柵掃描定位器的控制功能,有機(jī)發(fā)光顯示器(Organic Light Emitting Display,OLED)組成的顯示接口電路作為人機(jī)界
面的顯示,光敏電阻監(jiān)測(cè)氙燈的工作狀態(tài),繼電器及其驅(qū)動(dòng)電路組成的電源控制電路配合FX2實(shí)現(xiàn)單色激發(fā)光源的各部分電路按照預(yù)定程序加電,在系統(tǒng)異常的情況下可以關(guān)閉氙燈和光柵掃描器的電源。模數(shù)轉(zhuǎn)換電路及信號(hào)調(diào)理電路用于采集光電轉(zhuǎn)換的數(shù)據(jù),完成系統(tǒng)的自動(dòng)校準(zhǔn)。
圖1 外圍電路系統(tǒng)結(jié)構(gòu)圖
3.具體設(shè)計(jì)原理及方案
3.1 自動(dòng)校準(zhǔn)電路的設(shè)計(jì)
對(duì)于每一套單色光源系統(tǒng),即使采用相同的光學(xué)器件,在具體參數(shù)上也會(huì)不盡相同。所以對(duì)于每一套光學(xué)系統(tǒng),在使用之初和使用一段時(shí)間之后,必須對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn),以達(dá)到精確的測(cè)量。自動(dòng)校準(zhǔn)電路正是基于此目的,方便用戶而設(shè)計(jì)的。
3.1.1自動(dòng)校準(zhǔn)的原理
單色光源采用衍射光柵中的閃耀光柵作為分光元件。設(shè)計(jì)時(shí)選用光柵的一級(jí)光譜,由衍射定理可以推導(dǎo)出單色光源輸出波長(zhǎng)和相關(guān)角度之間的關(guān)系表達(dá)式為式(1)[2]:
(1)
式中 為輸出波長(zhǎng);
為光柵刻槽之間的間距;
為光柵背離角度,即入射光線與衍射光線之間的夾角;
為入射光線與衍射光線之間的二等分線距離光柵法線的夾角。
我們?cè)O(shè)計(jì)的單色光源系統(tǒng)保持入射光和反射光的方向不變,即保持二者的夾角β不變,而通過(guò)旋轉(zhuǎn)光柵來(lái)得到變化的波長(zhǎng)λ,實(shí)現(xiàn)波長(zhǎng)的連續(xù)調(diào)節(jié),并且特定的光柵其刻槽間距也是固定的。因此,衍射輸出波長(zhǎng)與光柵定位器的輸入電壓(Vi)成線性關(guān)系,用式(2)表示
=k Vi +b (2)
式中,k和b是常數(shù)。實(shí)驗(yàn)中我們通過(guò)確定兩個(gè)已知波長(zhǎng)(如400nm和588nm)對(duì)應(yīng)的輸入電壓,即可求出k和b,從而確定在整個(gè)光譜范圍內(nèi)單色激發(fā)光源系統(tǒng)的輸出波長(zhǎng)和光柵定位器的輸入電壓之間的函數(shù)關(guān)系。
3.1.2 自動(dòng)校準(zhǔn)的硬件設(shè)計(jì)
利用PC機(jī)上的光學(xué)掃描應(yīng)用程序,很方便實(shí)現(xiàn)系統(tǒng)的自動(dòng)校準(zhǔn)。當(dāng)整個(gè)單色光源系統(tǒng)在無(wú)PC機(jī)的環(huán)境下運(yùn)行時(shí),我們采用手控板來(lái)發(fā)送校準(zhǔn)命令,用FX2內(nèi)部集成的增強(qiáng)型8051來(lái)控制整個(gè)校準(zhǔn)過(guò)程。首先在光路的輸出端連接上一個(gè)多波段(400nm, 469nm, 588nm)窄帶濾光片和光電倍增管,光電倍增管的輸出電壓通過(guò)放大到-10V~+10V后連接到模數(shù)轉(zhuǎn)換電路模塊[4]。ADC的電路如圖2所示。其中采用的AD7895是ANALOG DEVICE公司生產(chǎn)的12位串行高速ADC,轉(zhuǎn)換時(shí)間3.8μs,輸入范圍可選,其中AD7895-10輸入范圍為-10V~+10V。通過(guò)電路中的數(shù)模轉(zhuǎn)換模塊發(fā)送-10V~+10V的模擬電壓,對(duì)整個(gè)波長(zhǎng)段進(jìn)行掃描。數(shù)模轉(zhuǎn)換模塊如圖3所示。其中采用的AD5322是12位精度、單電源供電、輸出緩沖為軌-軌的串行數(shù)模轉(zhuǎn)換器。AD7895和AD5322在FX2的控制下,實(shí)現(xiàn)同步的發(fā)送與采集。我們通過(guò)確定兩個(gè)已知波長(zhǎng)(如400nm和588nm)對(duì)應(yīng)的輸入電壓,通過(guò)公式2即可求出k和b。并將這兩個(gè)參數(shù)存儲(chǔ)在EEPROM中。
圖2 模數(shù)轉(zhuǎn)換及信號(hào)調(diào)理電路
圖3 數(shù)模轉(zhuǎn)換及信號(hào)調(diào)理電路
3.2 手控板的設(shè)計(jì)
手控板的主要功能是實(shí)現(xiàn)在無(wú)PC機(jī)的情況下,實(shí)現(xiàn)對(duì)整個(gè)單色光源系統(tǒng)的控制。主要包括選擇單色光源的控制方式(手控板控制,PC機(jī)控制,外部控制),發(fā)送自動(dòng)校準(zhǔn)命令及發(fā)送波長(zhǎng)數(shù)據(jù)等。
3.2.1 硬件設(shè)計(jì)
在手控板電路設(shè)計(jì)方案上,我們選擇了手控板的微處理機(jī)通過(guò)RS232協(xié)議與FX2通訊,由FX2控制將手控板電路發(fā)送的數(shù)據(jù)“翻譯”為相應(yīng)的模擬電壓來(lái)控制光柵掃描器。手控板系統(tǒng)的框圖如圖4所示。圖中OLED顯示和鍵盤掃面電路用于提供與用戶交互的界面。I2C存儲(chǔ)電路用于存儲(chǔ)用戶設(shè)置的波長(zhǎng)和其它參數(shù)。RS232和電源接口電路用于手控板的微處理器與FX2通訊并為手控板供電。
圖4 手控板系統(tǒng)框圖
圖5手控板菜單結(jié)構(gòu)圖
3.2.2 多級(jí)菜單的軟件設(shè)計(jì)
人機(jī)界面的設(shè)計(jì)是手控板設(shè)計(jì)中比較復(fù)雜的工作,其涉及到多級(jí)菜單的編寫。根據(jù)手控板菜單結(jié)構(gòu)圖(如圖5所示),首先建立一個(gè)結(jié)構(gòu),并定義一個(gè)結(jié)構(gòu)變量KbdTabStruct。該結(jié)構(gòu)中共有7個(gè)結(jié)構(gòu)元素,分別是6個(gè)字符型變量和1個(gè)指針變量,6個(gè)字符型變量分別為當(dāng)前及各個(gè)按鍵的索引號(hào),也就是操作的狀態(tài)號(hào),最后1個(gè)指針變量指向需執(zhí)行函數(shù)。這樣就可以做一個(gè)結(jié)構(gòu)數(shù)組,在結(jié)構(gòu)數(shù)組里為每一個(gè)菜單項(xiàng)編制一個(gè)單獨(dú)的函數(shù),并根據(jù)菜單的嵌套順序排好本菜單項(xiàng)的索引號(hào),以及本級(jí)菜單項(xiàng)的上、下卷動(dòng)的索引號(hào)和上、下級(jí)菜單的索引號(hào)[5]。具體程序如下所述:
typedef struct
{
BYTE KeyStateIndex; //當(dāng)前狀態(tài)索引號(hào)
BYTE KeyF1State; // 按下F1”鍵時(shí)轉(zhuǎn)向的狀態(tài)索引號(hào)
BYTE KeyF2State; // 按下F2”鍵時(shí)轉(zhuǎn)向的狀態(tài)索引號(hào)
BYTE KeyF3State; // 按下F3”鍵時(shí)轉(zhuǎn)向的狀態(tài)索引號(hào)
BYTE KeyF4State; // 按下F4”鍵時(shí)轉(zhuǎn)向的狀態(tài)索引號(hào)
BYTE KeyCancelState; // 按下取消鍵時(shí)轉(zhuǎn)向的狀態(tài)索引號(hào)
void (*CurrentOperate) ( ); // 當(dāng)前狀態(tài)應(yīng)該執(zhí)行的功能操作
} KbdTabStruct;
KbdTabStruct code KeyTab[SIZE_OF_KEYBD_MENU] =
{
{0,1,1,1,1,1,(*Welcome)},
{1,2,3,4,1,1,(*ControlSel)},
{2,5,6,7,2,1,(*ManusCon)},
{3,3,3,3,3,1,(*PCCon)},
{4,4,4,4,4,1,(*ExCon)},
…………
{29,29,29,29,29,11,(*TRITC)},
};
手控板中實(shí)際運(yùn)用的菜單達(dá)29屏,分為5層,采用上面的方法,較好地解決了多層萊單顯示的問(wèn)題。主程序一旦編制完畢則不需要因?yàn)椴藛蔚男薷亩薷?,除非要添加新的功能。添加菜單或變量時(shí)只需按照順序向菜單庫(kù)或變量庫(kù)中加入,刪除或修改菜單也只需對(duì)菜單庫(kù)中相關(guān)菜單進(jìn)行操作即可。
4.結(jié)束語(yǔ)
按照本文的設(shè)計(jì),實(shí)現(xiàn)了對(duì)單色光源光學(xué)系統(tǒng)的有效控制。本文作者創(chuàng)新點(diǎn):整個(gè)單色光源系統(tǒng)能夠在脫離PC的環(huán)境下,通過(guò)手控板實(shí)現(xiàn)自動(dòng)校準(zhǔn)等功能;簡(jiǎn)單實(shí)現(xiàn)且易于維護(hù)的多級(jí)菜單提供了友好的人機(jī)界面,提高了系統(tǒng)的智能化水平。本外圍控制電路經(jīng)過(guò)一定的改進(jìn),配合單色光源光學(xué)系統(tǒng),可以形成一套完整的單色激發(fā)光源系統(tǒng),在性能上將完全能夠達(dá)到國(guó)外同類產(chǎn)品的水平,能夠廣泛運(yùn)用于各種熒光顯微檢測(cè)系統(tǒng)中。
參考文獻(xiàn)
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