近日,北京大學工學院生物醫(yī)學工程系席鵬小組實現(xiàn)了STED超分辨率光學顯微成像,并用這一新型顯微技術(shù)實現(xiàn)了對細胞內(nèi)三大細胞骨架的成像。相關(guān)論文發(fā)表在美國《公共科學圖書館—綜合》(PLoS ONE)。
傳統(tǒng)的顯微技術(shù)受到衍射極限的限制,使得生物學家無法觀測到水平方向低于200nm的細胞器結(jié)構(gòu)。在最近的十年內(nèi),一系列的超分辨顯微技術(shù)被發(fā)明出來,包括德國馬普生物物理化學研究所的Stefan Hell教授發(fā)明的受激輻射光淬滅(STED)技術(shù),和霍華德休斯醫(yī)學研究所(HHMI)的Eric Betzig、莊小威教授等人發(fā)明的隨機光學定位重構(gòu)顯微(PALM/STORM)技術(shù),以及同在HHMI的Mats Gustaffson教授發(fā)明的飽和結(jié)構(gòu)光學顯微技術(shù)。其中,由于STED直接在物理學家熟悉的點擴展函數(shù)上進行調(diào)制,因此能夠?qū)崿F(xiàn)更快的成像速度,且不特別依賴于熒光染料,因此備受關(guān)注。
伴隨其優(yōu)勢的是,STED需要在納米量級的精度上將兩束光的點擴展函數(shù)進行配準,因此相比其他方法的工程難度較大。雖然現(xiàn)在Leica已經(jīng)有STED超分辨顯微商用系統(tǒng),然而其價格高昂,使得一般實驗室難以配備。同時,在國際上以及我國國內(nèi),有一批研究者曾經(jīng)致力于雙光子研究,而雙光子過程所需的鈦寶石激光器能夠滿足STED超分辨率顯微的需要。基于這一點,席鵬課題組在一臺6W泵浦的鈦寶石激光器上,通過連續(xù)光調(diào)諧,實現(xiàn)了60nm的顯微分辨率,這一分辨率僅為入射光波長的十分之一。這一工作也是我國科技工作者首次在實驗上實現(xiàn)了STED超分辨的標志。
這一研究將為眾多的科技工作者在利用現(xiàn)有鈦寶石激光器搭建超分辨率顯微系統(tǒng)方面提供指引,并拓展STED超分辨顯微技術(shù)在生物亞細胞成像中的應(yīng)用。