這個世界上有很多物質(zhì)是沒有紫外吸收的有機物質(zhì)，如人參皂苷、黃芪甲苷等。人參皂苷是一種固醇類化合物，三萜皂苷。主要存在于人參屬藥材中。人參皂苷被視為是人參中的活性成分，因而成為研究的目標。因為人參皂苷影響了多重的代謝通路，所以其效能也是復雜的，而且各種人參皂苷的效能是難以分離出來的。黃芪多糖中的主要有效成份是多糖和黃芪苷。黃芪苷分為黃芪苷Ⅰ、黃芪苷Ⅱ、黃芪苷Ⅳ？其中生物活性最好的是黃芪苷IV即黃芪甲苷。一般我們用蒸發(fā)光散射檢測器來檢測這些物質(zhì)。
蒸發(fā)光散射檢測器已經(jīng)開發(fā)生產(chǎn)15年，但是對于許多色譜工作者來說，它仍是一個新產(chǎn)品。第一臺ELSD是由澳大利亞的Union Carbide研究實驗室的科學家研制開發(fā)的，并在八十年代初轉(zhuǎn)化為商品，八十年代以激光為光源的第二代ELSD面世。此后，通過不斷設(shè)計提高了ELSD的操作性能。現(xiàn)在ELSD越來越多的作為通用型檢測器用于高效液相色譜、超臨界色譜（SFC）和逆流色譜中。ELSD最大的優(yōu)越性在于能檢測不含發(fā)色團的化合物，如：碳水化合物、脂類、聚合物、未衍生脂肪酸和氨基酸、表面活性劑、藥物，并在沒有標準品和化合物結(jié)構(gòu)參數(shù)未知的情況下檢測未知化合物。
工作原理
蒸發(fā)光散射檢測器的獨特檢測原理為，首先將柱洗脫液霧化形成氣溶膠，然后在加熱的漂移管中將溶劑蒸發(fā)，最后余下的不揮發(fā)性溶質(zhì)顆粒在光散射檢測池中得到檢測。
1、霧化：
液體流動相在載氣壓力的作用下在霧化室內(nèi)轉(zhuǎn)變成細小的液滴，從而使溶劑更易于蒸發(fā)。液滴的大小和均勻性是保證檢測器的靈敏度和重復性的重要因素。
蒸發(fā)光散射檢測器，通過對氣壓和溫度的精確控制，確保在霧化室內(nèi)形成一個較窄的液滴尺寸分布，使液滴蒸發(fā)所需要的溫度大大降低。
2、蒸發(fā)：
載氣把液滴從霧化室運送到漂移管進行蒸發(fā)。在漂移管中，溶劑被除去，留下微粒或純?nèi)苜|(zhì)的小滴。蒸發(fā)光散射檢測器采用低溫蒸發(fā)模式，維持了顆粒的均勻性，對半揮發(fā)性物質(zhì)和熱敏性化合物同樣具有較好的靈敏度。
3、檢測：
光源采用激光，溶質(zhì)顆粒從漂移管出來后進入光檢測池，并穿過激光光束。被溶質(zhì)顆粒散射的光通過光電倍增管進行收集。溶質(zhì)顆粒在進入光檢測池時被輔助載氣所包封，避免溶質(zhì)在檢測池內(nèi)的分散和沉淀在壁上，極大增強了檢測靈敏度并極大地降低了檢測池表面的污染。
下載文檔
